电泳检测提取的DNA完整性
更新日期:2022-03-16     浏览次数:60
核心提示:1.2.2 DNA的提取 充分研磨收集的半夏样品,然后采用CTAB法对半夏基因组DNA进行提取,详细步骤参考李荣华等的研究[15] 。通过电泳检测提取的DNA完整性

1.2.2  DNA的提取  充分研磨收集的半夏样品,然后采用CTAB法对半夏基因组DNA进行提取,详细步骤参考李荣华等的研究[15] 。通过电泳检测提取的DNA完整性,基于吸光度值测定分析其纯度及浓度。检测后的高质量DNA样品保存于-80℃,备用。

1.2.3  MSAP分析  基于限制性内切酶组合EcoR Ⅰ/Hpa Ⅱ和EcoR Ⅰ/Msp Ⅰ 分别对抽提的各组样品DNA进行酶切处理及接头连接。参照晁秋杰等人[14] 的MSAP体系程序进行预扩增和选择性扩增,接头及相关扩增引物均交由通用生物系统(安徽)有限公司合成(表1)。扩增产物经6% 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显色后,统计相关引物扩增的总条带数,根据条带的有无进行甲基化状态分析。

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